免疫印迹法(Western blot),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。免疫印迹实验的原理是利用特定抗体能够专一结合其抗原蛋白质的原理来对样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息,来分析检测特定蛋白质的生物学检测技术。
简单来说,免疫印迹实验是通过抗体与抗原之间的特异性结合来检测目标蛋白质。这个过程通常包括将蛋白质样品通过SDS-PAGE电泳分离,然后将分离后的蛋白质从凝胶转移到固相支持物(如PVDF膜或硝酸纤维素膜)上。然后使用特异性抗体(一抗)与转印后膜上的靶蛋白进行结合,再使用标记的二抗与一抗结合。最后,使用适当的底物进行显色或发光以检测目标蛋白质。