皮下移植瘤的接种

1.细胞接种：

1.1从冰盒中取出盛有细胞悬液的容器，可来回缓慢颠倒摇晃，彻底混匀细胞悬液；

1.2用一次性1ml无菌注射器吸取适量细胞悬液（如果每只注射0.1ml，则一次吸5只动物的量，即0.5ml），将盛有细胞悬液的容器盖好盖后继续放于冰盒中等待下次接种；

1.3用左手抓取小鼠，暴露动物右侧皮肤，并用75%酒精棉球进行消毒（消毒必须以进针点为原点，向周围扩大），注射器针尖向上从小鼠右侧背部肋缘下部处刺入，针头紧贴皮肤下层向前移动，移动过程中为确保针头在皮下部位处。待针尖抵达背右侧肩背部时，于动物皮下注射细胞悬液。退出注射器时旋转针头360度，使针尖的斜面贴着皮肤退出；

1.4接种完将小鼠放回笼中时要观察小鼠是否出现异常情况，若无异常情况则继续接种；

1.5接种剩余的细胞悬液加入适量84消毒液原液（84消毒液的体积不少于细胞悬液体积的1/10）后连同容器丢弃在医疗废弃物桶内；

1.6用过的注射器丢弃在锐器盒内。

2.肿瘤瘤块接种

2.1实验动物的准备：取出待接种肿瘤细胞的实验动物，按要求剔除接种区被毛；

2.2供体动物的准备：选取生长状态良好、肿瘤无破溃、瘤体积大小为500-800mm³的荷瘤鼠作为供体动物，二氧化碳/颈椎脱臼方法安乐死荷瘤鼠；

2.3瘤块的准备：取安乐死的荷瘤鼠，用75%酒精棉球消毒肿瘤部位皮肤，取出肿瘤组织；

2.4将包裹在肿瘤组织外周的包膜、血管及坏死的组织剔除干净，剪开肿瘤，选取鱼肉状的组织。切成大小适中的瘤块（约3mm×3mm×3mm），放置于盛有无血清培养液的培养皿中，培养皿下方要放置冰块以保证肿瘤细胞的活力；

2.5瘤块的接种：将肿瘤组织放于无菌套管针中，操作人员左手抓取动物，暴露动物右半侧皮肤，另一只手持穿刺针从鼠右侧肋缘下部处刺入。移动过程中为确保穿刺针在皮下部位处，待针尖抵达右侧肩背部时，后推针栓将瘤块推入针尖部位；

2.6助手用眼科弯镊夹住肿瘤组织下方，同时操作人员迅速将穿刺针从动物皮下抽出；

2.7接种过程中产生的废液连同容器丢弃在医疗废弃物桶内；

2.8无菌套管针进行消毒处理。