1. 联合用药实验流程:首先进行单药的敏感性筛选,然后选择对两个化合物中度敏感或者抵抗的细胞系进行联合用药研究;两个化合物可以进行fixed-dose或者fixed-ratio进行联合用药研究。
2. 细胞:复苏后培养一周后方可用于实验;连续培养不超过4周;
3. 接种时间:贴壁细胞需在加药处理前一天接种,悬浮细胞可以在加药处理当天或者提前一天接种
4. 接种密度:对于72hr处理,一般接种3000-6000细胞/孔/100 uL培养基;如果需要延长处理时间,则需要降低或者优化接种密度;
5. 处理时间:一般72hr,或者两个细胞倍增时间,也可以由客户指定时间;
6. 化合物浓度:根据单独用药时确定的IC50值来设定联合用药的浓度范围;
7. 复孔:无需复孔;可以整板重复;
8. 检测试剂: Promega CellTiter-Glo® (CTG)assay
9. 数据结果:单药IC50,联合用药指数(CI)