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肝微粒体代谢稳定性测试
肝微粒体稳定性分析是采用提取的肝脏细胞的微粒体来研究化合物的代谢稳定性。肝脏微粒体主要为细胞的内质网,含有很多参与药物代谢的酶,包括细胞色素P450,黄素单加氧酶,羧酸酯酶和环氧水解酶等。由于不同批次的肝微粒体可能会产生较大的差异,因此如果需要严格比较整个项目中化合物的肝微粒体稳定性,需要提前规划并订购同一批肝微粒体。
肝微粒体代谢稳定性实验方案
测试化合物浓度
10µM
微粒体物种
大鼠,小鼠,犬,猴,人
微粒体蛋白浓度
0.7mg/mL
孵育时间(min)
0,10, 30, 60
辅助因子
NADPH
DMSO在体系中的终浓度
<0.25%
阳性对照化合物
Clozapine, Verapamil
NCF60(不添加NADPH的体系孵育60分钟)
检测方法
LC-MS/MS
实验结果
T1/2, CLint, CLH, ER
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