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体外生物学
酶学活性实验
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酶学实验
酶学实验作为最简单的生物反应体系,能够准确地反映出待评价化合物对于特定的酶的抑制或者活化能力。虽然酶学反应体系很简单,但是开发一个可以用于评价化合物的酶学体系仍然充满挑战。
对于一个酶学实验的开发与验证,通常需要一下几个步骤:
确认合适的底物并确定反应信号与酶浓度的线性关系范围
选择合适的反应体积(微孔板)并优化反应缓冲液
测定米氏常数以确定ATP浓度
反应动力学测定
利用对照化合物进行方法验证
在项目进行过程中对方法进一步优化并验证
在拓维生物,我们会对每一个酶学方法按照上述的步骤进行优化。更加具体的内容,请参考酶学方法开发与验证(链接到技术资源部分)
酶学实验通量可以为96-孔板或者384-孔板筛选。
反应类型包括
TR-FRET/HTFR
,
Alpha-screen
,
AlphaLISA
,
Transcreener assay
,
ADP-Glo™ Kinase Assay
等。
拓维生物已经开发验证的酶学方法包括:TRKA wt, TRKA G595R, TRKA G667C, TRKB wt, TRKC wt, TRKC G696A, TRKC G623C, ALK, MET, MET F1200I, ROS1等。
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